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技術(shù)文章

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含血清和無血清MSC培養(yǎng)基該怎么選？滿滿干貨來啦！MSC培養(yǎng)基大部分科研伙伴培養(yǎng)MSC會使用常規(guī)的DMEM/F12，或a-MEM，加上胎牛血清。而對于臨床使用的胎牛血清（FBS）存在擔(dān)憂：（1）不同批次的FBS的可變性;（2）其定義不明確的性質(zhì);（3）FBS含有有害污染物的可能性，如朊病毒、病毒和人畜共患病試劑。大多數(shù)MSC培養(yǎng)通常使用胎牛血清（FBS）作為培養(yǎng)基的補(bǔ)充。然而，為了避免傳播異種傳染病和免疫的風(fēng)險，F(xiàn)BS的替代品有人血清、富血小板血漿和血小板裂解物（HPL）。推薦產(chǎn)品：GEMINI100-512人AB血清血清替...

2020 10-30
間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）如何培養(yǎng)與鑒定？相比于胚胎干細(xì)胞或神經(jīng)干細(xì)胞，MSC具有易獲取、易體外培養(yǎng)、傳代穩(wěn)定性、低免疫原性等優(yōu)勢，在體外經(jīng)過多次傳代后仍具有多向分化和自我復(fù)制的潛能，且MSCs多來自于成年的組織，研究過程的道德和倫理學(xué)問題較小。MSC的大小與形狀具有異質(zhì)性，即不同種屬或不同組織的MSC具有不同的生長形態(tài)，例如三極形、長梭形、小圓形、短梭形和扁平形態(tài)。幾乎所有的MSC都是貼壁生長，具有較強(qiáng)的貼壁能力，而MSC的原代分離也正是利用了MSC強(qiáng)貼壁的特性。例如，骨髓MSC的分離方法為：將從組織中分離出來的單...

2020 10-30
關(guān)于膠原酶配置后的保存方法膠原酶是從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬消化的組織較硬，內(nèi)含較多結(jié)締組織或膠原成分時，用胰蛋白酶解離細(xì)胞的效果較差，這時可采用膠原酶解離細(xì)胞法。膠原酶僅對細(xì)胞間質(zhì)有消化作用而對上皮細(xì)胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組織，可使上皮細(xì)胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為*終濃度200U/ml（約為1mg/mL）或0.03%~0.3%。膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細(xì)胞膠原酶，要根據(jù)所要分離消化的組織類型選擇膠原酶類型...

2020 10-24
如何配置膠原酶膠原酶按其存在的方式不同可分為人體內(nèi)源性膠原酶和藥用膠原酶兩種。人體內(nèi)源性膠原酶是指人體內(nèi)部本身所具有的膠原酶，如牙齦、觸膜等上皮組織和關(guān)節(jié)滑膜、椎間盤內(nèi)都不同程度的存在著這種膠原酶，它在體內(nèi)膠原蛋白的分解過程中發(fā)揮著*的作用。藥用膠原酶是指利用生物制藥的高科技手段從溶組織梭狀芽孢桿菌的發(fā)酵液中提取、純化并精制而得的白色或類白色無菌凍干粉針生物制劑。膠原酶（collagenase）是從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬消化的組織較硬，內(nèi)含較...

2020 10-20
WGA技術(shù)如何選擇？單細(xì)胞全基因組測序技術(shù)是在單細(xì)胞水平對全基因組進(jìn)行擴(kuò)增與測序的一項(xiàng)技術(shù)，其原理是對分離的單個細(xì)胞的微量全基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增，獲得高覆蓋率的完整的基因組后進(jìn)行高通量測序，廣泛應(yīng)用于癌癥研究、胚胎發(fā)育、輔助生殖、細(xì)胞分化、免疫機(jī)制、微生物等方向的研究。獲得高覆蓋度高保真性的全基因組擴(kuò)增產(chǎn)物是準(zhǔn)確全面的測序結(jié)果的保障。為了保證基因組高覆蓋度無偏好性的擴(kuò)增，在單細(xì)胞測序技術(shù)誕生的近二十年時間里，全基因組擴(kuò)增技術(shù)經(jīng)歷了幾次重大的變革，WGA主要有三種方式：DOP-PCR，MDA，MA...

2020 10-16
膠原酶的使用膠原酶的化學(xué)名為膠原蛋白水解酶，它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結(jié)構(gòu)，而不損傷其它蛋白質(zhì)和組織。膠原酶的化學(xué)本質(zhì)是一種蛋白質(zhì)，因此，它對溫度、PH和導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的各種因素均非常敏感，極易受到外界條件的影響而改變其本身的構(gòu)象和性質(zhì)。膠原酶是從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬消化的組織較硬，內(nèi)含較多結(jié)締組織或膠原成分時，用胰蛋白酶解離細(xì)胞的效果較差，這時可采用膠原酶解離細(xì)胞法。膠原酶僅對細(xì)胞間質(zhì)有消化作用而對上皮...

2020 10-16
當(dāng)ThruPLEX技術(shù)遇上FFPE樣本，會帶來怎樣的“*操作”！FormalinFixedａndParaffinEmbeddedFFPE樣本作為生物和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要樣本來源，廣受研究者的青睞。由于樣本固定和儲存過程中，容易發(fā)生核酸的降解和損傷，因此獲得符合測序質(zhì)量要求的文庫通常很具有挑戰(zhàn)性。那么面對做DNA-Seq的FFPE樣本，應(yīng)該如何應(yīng)對呢？“想要隨心所欲的進(jìn)行FFPE-DNA樣本文庫構(gòu)建”，這個神器值得擁有?【SMARTerThruPLEXDNA-SeqKit】“飛一般感覺”的操作FFPE樣本珍貴，擔(dān)心在文庫制備時損失？選擇它吧。該...

2020 10-12
病原微生物NGS解決方案來了，您準(zhǔn)備好項(xiàng)目了嗎？病原微生物NGS解決方案來了，您準(zhǔn)備好項(xiàng)目了嗎？人類與感染性疾病的戰(zhàn)斗持續(xù)了幾千年。但自17世紀(jì)列文虎克用顯微鏡觀察到微生物后，人類才逐漸認(rèn)知到了感染性疾病是由病原微生物導(dǎo)致，逐步開啟了病原微生物的研究。主要的研究方法包括經(jīng)典的培養(yǎng)鑒定法、實(shí)時熒光定量PCR法、NGS分析、質(zhì)譜分析等多種方法。其中NGS由于可直接從宿主中快速而正確地檢測鑒別病原體的全基因組序列，以及通量高、數(shù)據(jù)庫全等特點(diǎn)，逐漸成為微生物研究領(lǐng)域的重要方法，并為后續(xù)實(shí)現(xiàn)對感染性疾病診斷、治療及預(yù)防提供技術(shù)保障。...

2020 10-12

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