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ProteanFect和Lipo系列轉(zhuǎn)染試劑的區(qū)別,怎么選擇?

更新時(shí)間:2025-01-15 點(diǎn)擊次數(shù):80
ProteanFect和陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染(Lipo)是兩種常用的轉(zhuǎn)染技術(shù),它們?cè)趯?shí)驗(yàn)原理、操作步驟和適用范圍上存在一些區(qū)別。

實(shí)驗(yàn)原理

Lipo轉(zhuǎn)染
  • 利用帶正電的陽離子脂質(zhì)體與帶負(fù)電的DNA通過靜電作用力結(jié)合形成DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物。
  • 復(fù)合物被細(xì)胞膜表面吸附后通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,在內(nèi)涵體內(nèi)釋放,可能通過膜融合或內(nèi)吞體破裂等方式將DNA釋放到細(xì)胞質(zhì)中。
  • 最終DNA通過細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核,實(shí)現(xiàn)外源基因的表達(dá)。
ProteanFect轉(zhuǎn)染
  • 核酸藥物與內(nèi)源蛋白自動(dòng)組裝形成ProteanFect-核酸復(fù)合物。
  • 細(xì)胞主動(dòng)攝入ProteanFect-核酸復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞,核酸分子釋放,內(nèi)源蛋白被內(nèi)在降解途徑降解。
  • 外源基因表達(dá)。

操作步驟

Lipo轉(zhuǎn)染
  1. 將核酸與Lipofection Reagent混合形成復(fù)合物。
  2. 將復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)體系中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
  3. 經(jīng)過12-72小時(shí)后進(jìn)行基因表達(dá)檢測(cè)。
ProteanFect轉(zhuǎn)染
  1. 制備ProteanFect轉(zhuǎn)染體系。
  2. 將ProteanFect轉(zhuǎn)染體系加入待轉(zhuǎn)染細(xì)胞。
  3. 根據(jù)細(xì)胞類型孵育15-120分鐘,最快可在結(jié)束反應(yīng)1小時(shí)后觀察到目的基因的表達(dá)。

適用范圍

Lipo轉(zhuǎn)染
  • 不適用于難轉(zhuǎn)細(xì)胞系和原代細(xì)胞,因?yàn)檫@些細(xì)胞可能對(duì)Lipo轉(zhuǎn)染產(chǎn)生較大毒性,轉(zhuǎn)染效率低,且對(duì)培養(yǎng)條件有特殊要求。
ProteanFect轉(zhuǎn)染
  • 適用于多種細(xì)胞系,包括難轉(zhuǎn)細(xì)胞系和原代細(xì)胞,因?yàn)镻roteanFect具有高轉(zhuǎn)染效率和低細(xì)胞毒性,且操作簡(jiǎn)便。

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