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人PBMC中免疫細(xì)胞分類(lèi)

更新時(shí)間:2014-02-07 點(diǎn)擊次數(shù):6832

    人外周血作為免疫系統(tǒng)來(lái)研究時(shí),通常需要通過(guò)密度梯度離心去除紅細(xì)胞。zui常用的是利用Ficoll Paque將全血分成高于和低于1.077g/ml兩種密度的組分。
    外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)密度較小,位于Ficoll上層,也稱為buffy coat。紅細(xì)胞和包括中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞在內(nèi)的多形核細(xì)胞(PMNs)密度大于1.077g/ml可被除去。嗜堿性粒細(xì)胞的密度在1.077g /ml左右,部分仍然存在于PBMC組分中。
    PBMCs 包括淋巴細(xì)胞(T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞)、單核細(xì)胞和DC細(xì)胞。在人類(lèi)中,這些細(xì)胞群的比例在個(gè)體中有所差異。通常PBMCs中,淋巴細(xì)胞占70 – 90%,單核細(xì)胞占10 – 30%,而DC細(xì)胞則只占1 -2%。在淋巴細(xì)胞中,CD3+ T細(xì)胞占70 – 85%(在PBMCs中占45 – 70%),B細(xì)胞占5 – 20%(在PBMC中zui多15%),NK細(xì)胞占5 – 20%(在PBMC中zui多15%)。
    CD3+ T細(xì)胞由CD4+ T細(xì)胞(在PBMCs中占25 – 60%)和CD8+ T細(xì)胞(在PBMCs中占5 – 30%)組成,兩者比例在2:1左右。CD4+ T細(xì)胞和CD8+ T細(xì)胞可進(jìn)一步分為幼稚細(xì)胞、抗原接觸的中樞記憶細(xì)胞、效應(yīng)記憶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞亞群。
    CD4+ T細(xì)胞為輔助性T細(xì)胞,根據(jù)特異性細(xì)胞因子、表面分子或轉(zhuǎn)錄因子可進(jìn)一步分為各種功能亞群,包括調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、Th1、Th2、Th17、Th9、Tfh 和Tr1等亞型。而近年來(lái)發(fā)現(xiàn)CD8+ 細(xì)胞毒性T細(xì)胞的表型和功能差異非常大,也許有200種功能表型,因此對(duì)其的研究會(huì)非常復(fù)雜。
    在外周血中,B細(xì)胞分為過(guò)渡期、幼稚、記憶亞群以及漿細(xì)胞。DC細(xì)胞包括漿細(xì)胞樣DC細(xì)胞(pDC)和髓系衍生的DC細(xì)胞(mDC)。單核細(xì)胞可分為經(jīng)典單核細(xì)胞和非經(jīng)典CD16+促炎性單核細(xì)胞,后者在單核細(xì)胞中zui多占10%,具有*的功能。
    人類(lèi)免疫系統(tǒng)的研究著重于對(duì)PBMCs的表型和功能研究。為了通過(guò)PBMCs研究人的免疫系統(tǒng),了解外周血中存在的細(xì)胞種類(lèi),以及其如何在組織中分化和發(fā)揮功能是很重要的。zui后,熟悉細(xì)胞表面和胞內(nèi)表型鑒定、以及的檢測(cè)方法也是非常關(guān)鍵的。

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